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原代细胞实验废弃的处理方法

时间:2017/12/14阅读:275
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原代细胞上清
    取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、  细胞裂解液
1)  吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2)  收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3)  加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4)  将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5)  4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
组织匀浆液
1)  将组织样本用PBS (0.01 [锚点] [锚点] M, PH 7.4) 冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2)  将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3)  将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)
4)  原代细胞吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
6、  尿液、唾液等其他液体生物样本
供检查用    50mg    101109-201001    山梨醇
供HPLC法    200mg    101116-201001    地塞米松磷酸酯
供检查用    50mg    101121-201001    非诺贝特杂质Ⅰ
供检查用    50mg    101122-201001    非诺贝特杂质Ⅱ
供检查用    30mg    101124-201001    2-巯基
供检查用    100mg    101126-201001    1,3-丙二醇
供HPLC法    50mg    101128-201001    可的松
供检查用    50mg    101132-201001    
供HPLC含量    20mg    101135-201001    消旋山莨菪碱杂质I
原代细胞

 

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