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雌二醇(E2)含量ELISA测试盒​测定步骤

时间:2022/1/18阅读:748
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雌二醇(E2)含量ELISA测试盒测定步骤:

1.加样

1.除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样,不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温浴

1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受体抗体

phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗体

phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗体

phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化复制因子2抗体

3-Apr凋亡相关蛋白3抗体

ATG18自噬相关蛋白18抗体

ATG4A自噬相关蛋白4A抗体

APOA4载脂蛋白A4抗体

ALOX1212脂氧合酶抗体

Angiotensin III血管紧张素III抗体

ADCY3腺苷酸环化酶3抗体

Angiomotin血管动蛋白抗体

Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗体

phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失调症蛋白1抗体

ANKRD17锚蛋白重复结构域蛋白17抗体

ALDH1A1胞质乙醛脱氢酶1抗体

ARL3ADP核糖基化样因子ARL3抗体

15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗体

ABC2乳腺癌增强蛋白2抗体

Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗体

Alpha B Crystallinα晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体

ADORA2B腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体

ARK5AMPK的相关蛋白激酶5抗体


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