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282次原代细胞培养基本信息简介
原代细胞来源于一块碎的或酶消化的组织。原代培养物,是多种类型细胞的混合物,保留了其来源组织的特点。
一段时间后,原代培养的细胞会达到融合状态,即在培养瓶中的所有可用空间由于细胞扩增都被覆盖。在此之后,细胞需要消化(通常用蛋白水解酶,如胰蛋白酶)为单个细胞并且传代(分裂,传代或转移)。在*次传代以后,培养物通常被称为一个细胞系。每一次传代培养,细胞群体由于快速生长的细胞占主导地位而变得更均匀。具有所需特性的细胞也可以通过克隆,从培养物中选出。
二倍体细胞很少可以倍增超过几代。它们只有有限的复制能力,并且在细胞倍增20至80次后开始减缓并Z终停止分裂。Z近的证据表明,某些细胞中观察到的细胞衰老与预计的复制性衰老不同,可能是由于不适当的培养条件导致的。还有其他数据显示,对某些物种的细胞系(尤其是人源的)即使生长在改进的培养条件下仍存在复制衰老。这种衰老是由细胞分裂时染色体末端(端粒)缩短调控的。
正如以上提到的,细胞系要么在培养瓶表面贴壁生长(锚定依赖性)要么悬浮生长(非锚定依赖性)。细胞的生长和分裂,通常遵循一个由四个阶段组成的特征性增长模式:停滞期,对数期(指数期),平稳期(平台期)和衰退期。
停滞期——将细胞接种至培养瓶之后,细胞逐步恢复的同时,缓慢生长。
对数期(指数期)——细胞进入一个对数生长的时期,一直持续到整个生长表面被占满或细胞密度超过培养基提供营养的能力。
平稳期——细胞增殖减慢或停止。
衰退期——如果不更换培养基且细胞数量不减少,细胞活力会下降,并出现细胞死亡。
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