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不同细胞培养基存储过程中的注意事项

时间:2017-5-4阅读:254
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通常液体细胞培养基避免- 20 ℃冻存,因为解冻时可能会有营养成份析出,影响培养效果;正常情况下于2℃~8℃避光保存,使用前从冰箱取出,放入室温进行平衡。通常的液体培养基有效期是6个月到12个月。液体细胞培养基尽量避免长期贮存,其中的谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解,如果细胞生长不良,可考虑检测培养基中的谷氨酰胺含量确定是否再补加谷氨酰胺。市售商业化液体细胞培养基有具体的有效期,对于使用干粉细胞培养基自行配制成液体以后,也应低温(2℃~8℃)贮存,除培养基中如谷氨酰胺易降解之外,培养基中的其他成份随着温度的升高也可能会发生降解或是析出。
在国内传统的生物制品过程中,配制的细胞培养基过滤后用转瓶进行分装,为防止液体过滤及分装时可能存在的污染性问题,常采用配制后于37℃搁置一段时间(7~14天),无菌方敢使用,但是对比试验显示,低温贮存的细胞培养基培养细胞的效果好于37℃存贮,通常对于过滤设备的验证合格后,过滤过程中间隔取样进行无菌验证即可;并且大批量长时间的高温贮存除可能对营养成份造成降解外,场地及高温的保持也造成了成本的提高。目前,对于一些较大规模的生物制品,已经实现管道化配制、使用,污染的安全性明显降低。
工业化中通常采购干粉细胞培养基,与液体培养基相比,存储方便且价格便宜,干粉细胞培养也应长期贮存在2~8℃,尤其是对于一些营养丰富的低血清和无血清细胞培养基,成份复杂且含量较高,有些成分的溶解性较低,过程中采用特殊的加工工艺提高其溶解性的同时,如果长期的高温或低温条件,也有可能改变其理化性质,在购买或是使用过程中,须严格按照产品说明书进行存储。

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