牛肾细胞;MDBK实验原理

牛肾细胞;MDBK接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
 
 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
 
 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的*培养基。
 
 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
 
 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得。
 
一．贴壁细胞  
客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。 
1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2  培养。

二．悬浮牛肾细胞;MDBK 
1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒）。
5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2  培养。

三．2ml小管操作方法。 
1. 用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）。
2. 严格无菌操作，用吸管吸出管中细胞至6ml*培养基混匀。
3换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO7  培养。
规格:        ≥98%            Mycophenolate mofetil    *：    霉酚酸酯    
规格:        ≥97%            Rosmarinic acid    *：    迷迭香酸    
规格:        ≥98%            Raffinose    *：    棉籽糖            
规格:        ≥98%            Raffinose    *：    棉子糖  
牛肾细胞;MDBK