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Tag-lite是SNAP-Tag与HTRF技术相结合,用来进行干细胞表面受体分析的一种技术。
SNAP和CLIP是小的融合标签蛋白,可特异地与底物通过苄甲基不可逆共价结合, 其底物分别为苄甲基鸟嘌呤(BG)和苄甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可与各种染料形成衍生物,这样,通过共价反应,染料就标记到SANP或CLIP上了。
SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白质的N端或C端,所以我们可以构建SNAP或CLIP与目标蛋白的表达载体。质粒转染、融合蛋白表达后,加入标记了荧光染料的底物,我们可以得到标记了荧光染料的目标蛋白。
在Tag-lite技术中,用pSNAP或pCLIP与编码目标GPCR的基因构建质粒,转染入细胞后,就可表达N端融合了SNAP或CLIP的目标GPCR。
底物(BG或BC)与HTRF荧光染料反应形成衍生物,例如与供体(Donor)铽穴状化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白与其反应,则Tb被标记到GPCR上。加入受体(Acceptor)荧光染料标记的配体,可以进行受体配体结合实验。根据实验目的,HTRF的能量受体(Acceptor)与底物形成衍生物,则Acceptor被标记到GPCR上,干细胞可以进行GPCR同源二聚化实验。除此之外,我们还可以进行GPCR异源二聚化实验、寡聚化实验以及内源化实验等细胞表面受体分析。
鉴别 含量: 进口/国产 棉酚 20mg/支 英文名称 111517-200001 规格:
UV法含量测定 含量: 进口/国产 雪胆素甲 20mg/支 英文名称 111518-200602 规格:
含量测定 含量: 进口/国产 木犀草素 20mg/支 英文名称 111520-200504 规格:
含量测定 含量: 进口/国产 金丝桃苷 20mg/支 英文名称 111521-201004 规格:
含量测定 含量: 进口/国产 升麻苷 20mg/支 英文名称 111522-201008 规格:
含量测定 含量: 进口/国产 5-O-甲基维斯阿米醇苷 20mg/支 英文名称 111523-200405 规格:
含量测定 含量: 进口/国产 木香烃内酯 20mg/支 英文名称 111524-201006 规格:
含量测定 含量: 进口/国产 去氢木香内酯 20mg/支 英文名称 111525-200706 规格:
干细胞
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