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干细胞表面受体配体结合检测的新技术

时间:2018-3-21阅读:440
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Tag-lite是SNAP-Tag与HTRF技术相结合,用来进行干细胞表面受体分析的一种技术。
    SNAP和CLIP是小的融合标签蛋白,可特异地与底物通过苄甲基不可逆共价结合, 其底物分别为苄甲基鸟嘌呤(BG)和苄甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可与各种染料形成衍生物,这样,通过共价反应,染料就标记到SANP或CLIP上了。
    SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白质的N端或C端,所以我们可以构建SNAP或CLIP与目标蛋白的表达载体。质粒转染、融合蛋白表达后,加入标记了荧光染料的底物,我们可以得到标记了荧光染料的目标蛋白。
    在Tag-lite技术中,用pSNAP或pCLIP与编码目标GPCR的基因构建质粒,转染入细胞后,就可表达N端融合了SNAP或CLIP的目标GPCR。
    底物(BG或BC)与HTRF荧光染料反应形成衍生物,例如与供体(Donor)铽穴状化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白与其反应,则Tb被标记到GPCR上。加入受体(Acceptor)荧光染料标记的配体,可以进行受体配体结合实验。根据实验目的,HTRF的能量受体(Acceptor)与底物形成衍生物,则Acceptor被标记到GPCR上,干细胞可以进行GPCR同源二聚化实验。除此之外,我们还可以进行GPCR异源二聚化实验、寡聚化实验以及内源化实验等细胞表面受体分析。
鉴别    含量:    进口/国产    棉酚    20mg/支    英文名称    111517-200001    规格:
UV法含量测定    含量:    进口/国产    雪胆素甲    20mg/支    英文名称    111518-200602    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    木犀草素    20mg/支    英文名称    111520-200504    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    金丝桃苷    20mg/支    英文名称    111521-201004    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    升麻苷    20mg/支    英文名称    111522-201008    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    5-O-甲基维斯阿米醇苷    20mg/支    英文名称    111523-200405    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    木香烃内酯    20mg/支    英文名称    111524-201006    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    去氢木香内酯    20mg/支    英文名称    111525-200706    规格:
干细胞

 

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