干细胞的培养步骤

干细胞的另一种培养方法
器械
显微器械：眼科剪一把，直弯眼科镊各一把，细结镊一把，手术刀一把，针头诺干
杀老鼠器械：手术剪一把，大镊子一把，弯眼科镊一把，组织钳一把，50ml烧杯一个（锡纸包好）
另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三个，小滤器两个，硅胶板一块，培养瓶盖子诺干
贰。研究人员发现，Numb的PTB结构域以一种非典型的模式特异性识别Pon中的重复模序，这种多位点结合诱导该复合物发生液-液相变（liquid-liquid phase transition， LLPT）分离，在体外和细胞中能够自发组装形成致密的无膜液相结构。而这种相变液滴可以被Numb PTB的竞争多肽破坏并去组装。在这些分相的液滴中，Numb/Pon复合物高度浓缩，但同时又与周围溶液中低浓度的Numb/Pon蛋白存在快速的动态交换，这一现象与在体数据高度吻合。
研究人员进一步证明Pon作用于Numb-Notch信号通路上游以促进NB的分化，而对Numb/Pon复合物相变过程的干扰将破坏果蝇神经干细胞不对称分裂时Numb的底部定位过程，并影响其不对称分离和对Notch信号通路的抑制，Z终形成肿瘤样NB增生。
专家表示，这项研究不仅揭示了Numb/Pon复合物调控神经干细胞不对称分裂的分子机制，也提示相变可能广泛地应用于细胞极化过程，即这种蛋白相互作用引起的相变可能是调控极性蛋白复合物在特定膜区域异位浓缩的一个普遍机理，这也为理解肿瘤的发生与转移机制提供了一个新的视角。
这样处理后，一般五天内不用看它，第六天开始，可以加入含20％FBS的DMEM
两种方法比较，贴壁法的优点在于时间较少，所用试剂少，不用出去离心，较少污染机会。
但据我们实验室的经验，贴壁法较消化法爬出干细胞的时间较长，且细胞不大纯，活性较差。战友们可以根据自己的需要选选择。
对照品    无味氯霉素A晶型    100mg    对照品
对照品    无味氯霉素B晶型    100mg    对照品
对照品    哌拉西林    200mg    对照品
对照品    头孢哌酮    200mg    对照品
对照品    头孢唑啉    200mg    对照品
对照品    克林霉素    100mg    对照品
对照品    氯唑西林    200mg    对照品
对照品    平阳霉素    8mg     对照品
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