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人正常组织来源细胞为了检测机体的免疫功能,可以通过体外或体内实验对参与免疫应答的不同细胞进行分离、鉴定及功能测定。用于上述免疫功能检测的材料Z常用的是外周血,也可以是胸腺、脾、淋巴结及各种组织。
一、免疫细胞的分离
体外测定免疫细胞的功能,首先要从不同材料中分离所需细胞。根据细胞的表面标志、理化性质及功能进行设计和选择不同的分离方法。
(一)外周血单个核细胞的分离
外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞。PBMC是免疫学实验Z常用的细胞,也是进行T、B细胞分离纯化过程的*步。常用的分离方法是葡聚糖-泛影葡胺(Ficoll-Urografin)密度梯度离心法。
(二)淋巴细胞及其亚群的分离
淋巴细胞及其亚群的分离有多种方法,如玻璃黏附法、尼龙毛分离法、E花环形成分离法等。由于单克隆抗体的应用和免疫学技术的发展,可通过以下方法进行分离。
1.免疫吸附分离法 将已知抗淋巴细胞表面标志的抗体包被聚苯乙烯培养板,加入淋巴细胞悬液,表达相应细胞表面标志的淋巴细胞被贴附在培养板上,可与细胞悬液中其他细胞分开。
2.磁珠分离法(immune magnetic bead, IMB) 近年来免疫磁珠法应用较广泛,是一种特异性分离所需淋巴细胞的方法。
3.荧光激活人正常组织来源细胞分离仪分离法(fluorescence activated cell sorting, FACS) FACS又称流式细胞术(flow cytometry, FCM),是一种集光学、流体力学、电力学和计算机技术于一体,可对细胞进行多参数定量测定和综合分析方法。
核突触蛋白-γIgG 人真胰岛素(TI)
核纤层蛋白AIgG 人真核翻译起始因子3a(eIF3a)
核纤层蛋白BIgG 人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)
核纤层蛋白CIgG 人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)
核小体结合蛋白1IgG 人粘蛋白/粘液素7(MUC7)
核小体组装蛋白1IgG 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)
核抑制蛋白磷酸酶1IgG 人粘蛋白/粘液素C(MUCC)
人正常组织来源细胞
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