沙门氏菌检测试剂盒(荧光PCR法) 返回列表页

服务流程：

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

豚鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)紫杉C神经突起生长诱导因子受体Unc5a抗体

豚鼠斑型POZ蛋白(SPOP)2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羟-7-差向-紫衫二磷酸葡萄糖神经酰葡萄糖转移酶2抗体

豚鼠白介素24 (IL-24)N-Debenzoyl-7-{[(2,2,2,-trichloroethyl)oxy]carbonyl}紫杉尿酸酶

豚鼠状腺球蛋白(TG)6α,3'-对二羟紫杉尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶抗体

豚鼠Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)7-差向 10-去酰紫衫荆豆凝集素1抗体

豚鼠分泌性白蛋白酶抑制因子(SLPI)(S,S)-帕洛诺司琼盐酸盐-d4尿路上皮特异蛋白3抗体

豚鼠水通道蛋白3(AQP-3) N-氧帕洛诺司琼尿路上皮特异蛋白1a抗体

豚鼠周期素依赖性激酶5(CDK5) 帕珠沙星去泛素酶16抗体

豚鼠质金属蛋白酶3(MMP-3) 培美曲塞二钠整合素结合性信号分子抗体

豚鼠胸腺质淋巴生成素(TSLP)培美曲塞二钠-d5磷酸化自噬相关蛋白1抗体

豚鼠抗生长激素抗体(GHAb) 培美曲塞-15N,13C5碱性成纤维生长因子受体1抗体

豚鼠核孔蛋白153kda(NUP153)磺噻唑钠盐珠蛋白抗体

豚鼠葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)匹格列酮-d4尿皮质素抗体

豚鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)羟匹格列酮（M-Ⅶ）泛素结合酶7相互作用蛋白5抗体

豚鼠信号素3B (SEMA3B) 5-去5-羧匹格列酮泛素特异性蛋白酶1抗体

豚鼠不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)酮匹格列酮（M-Ⅲ）线粒体脱偶连蛋白1抗体
沙门氏菌检测试剂盒(荧光PCR法)PAX1/FITC  荧光素标记配对盒因1抗体IgG氯代异烷 CP,97%

PAX2/FITC  荧光素标记配对盒因2抗体IgG溴代烷 99%

RACK1/FITC  荧光素标记受体激活蛋白激酶C1抗体IgG2,5-二溴 98%

PAX3/FITC  荧光素标记配对盒因3抗体IgG二溴氯烷 分析标准品

PAX5/FITC  荧光素标记配对盒因5抗体IgG二溴氯烷 98%

PAX7/FITC  荧光素标记配对盒因7抗体IgG1,10-二溴癸烷 95%

PAX8/FITC  荧光素标记配对盒因8抗体IgG对二溴 97%

PAX9/FITC  荧光素标记配对盒因9抗体IgG对二溴 99%