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规格 | 50T | 货号 | YS-P014414 |
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品牌 | YSRIBIO |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
服务流程:
公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 货号 |
空肠弯曲菌(CJ)检测试剂盒(荧光-PCR法) | 50T | YS-P014414 |
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
维兰特罗英文名称: n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)尿激酶型纤溶酶原激活因子受体抗体包装1g
维替泊芬英文名称: Octanedioic acid配对盒基因5抗体包装25g
乌利司他英文名称: Olive oilPEG3蛋白抗体包装5g
乌司他丁英文名称: o-Methoxycinnamaldehyde泛素连接酶抗体包装1g
西洛多辛英文名称: Orcein, synthetic帕金蛋白抗体包装25g
西米替汀英文名称: o-Vanillin程序性死亡1抗体包装5g
西替利英文名称: Oxalyldihydrazide过氧化还原酶3抗体包装25g
昔美酸沙美特罗英文名称: Oxazole前列腺酸性磷酸酶抗体包装5g
香兰素;香草英文名称: Palladium (II) acetate蛋白激酶AKT底物1抗体包装1g
溴芬酸钠英文名称: Palladium (II) chloridep21激活激酶1抗体包装1g
溴夫定英文名称: Palladium (II) nitrate dihydrate庚型肝炎病多聚蛋白抗体包装25g
溴化新斯的明英文名称: Palladium, powder内脂素/内脏脂肪素/前B克隆增强因子1抗体包装5g
溴后马托品英文名称: Pararosaniline acetate胰岛素原抗体包装1g
溴莫尼定英文名称: Paxilline*, from Penicillium paxilli平足蛋白gp36/管内皮蛋白抗体包装5g
盐酸阿比朵尔英文名称: Penicillic acid核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体包装1g
空肠弯曲菌(CJ)检测试剂盒(荧光-PCR法)Tn-T(Human Troponin T) ELISA Kit 人肌钙蛋白T氯化金(III) 水合物 Au ≥48%
ES-Ab(Human Endostatin antibody) ELISA Kit 人血管内皮抑素抗体三氯化金水溶液 Au 23.5~23.8%
Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型金丝/金粉 99.99%
ANGPTL3(Human angiopoietin-like protein 3) ELISA Kit 人血管生成素样蛋白3酸银 AR,99.5%
Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit 人α肌动蛋白碳酸银 AR,99.0%
ANKRD1(Human cardiac ankyrin repeat domain 1) ELISA Kit 人心肌锚蛋白重复域1氧化银 AR,99.7%
LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦素受体硝酸银 AR,99.8%
AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅱ受体2硝酸银 99.99% metals basis
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