鸡减蛋综合征病毒-1976 PCR试剂盒 返回列表页

服务流程：

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

猴维生素D结合蛋白(DBP)儿茶素没食子酯酸微管驱动蛋白家族成员1A抗体

猴失调症蛋白质2(ATXN2)氯化镁铵,氯化铵镁,六水合氯化镁铵离子通道蛋白家族成员1抗体

猴趋化因子C-C-元配体16(CCL16)3-(4-溴)-5--1H-吡唑离子通道蛋白家族成员1样蛋白抗体

猴T受体(TCR)诃子林鞣酸离子通道蛋白家族成员2抗体

猴睾酮受体(TR)诃子鞣质,诃子鞣酸G蛋白激活内向通道5抗体

猴黑素瘤黏附分子(MCAM)剑麻皂苷元(标准品)离子通道多聚体结构域蛋白12抗体

猴补体因子3(C3)  蟛蜞菊内脂;蟛蜞菊内酯(标准品)抑癌蛋白EZH2抗体

猴促有丝分裂因子(MF/MPF) 1,5-异喹啉二,1,5-二羟异喹啉DNA修复酶Ku70抗体

猴β葡糖苷酶(β-Glu) 甜橙黄酮DNA修复酶Ku-80抗体

猴接触蛋白相关蛋白样蛋白2(CNTNAP2)白屈菜碱(标准品)14号染色体开放阅读框106抗体

猴同线蛋白2(ST2)葫芦素D;葫芦苦素D脑蛋白9抗体

猴过氧化物酶体增殖物激活受体γ( PPAR-γ)白头翁皂苷A3(标准品)通道相互作用蛋白2抗体

猴尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(PLAUR/uPAR)黄花败酱甙C;牡丹草苷B(标准品)剑蛋白p60亚A1抗体

猴粘蛋白21(MUC21)齐墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠李糖(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷(标准品)Kazrin蛋白抗体

猴胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)Hederacolchiside A1(标准品)离子通道多聚体结构域蛋白8抗体

猴α羟丁酸脱氢酶(αHBDH) 常春藤苷H;灰毡毛忍冬次皂苷磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白抗体
鸡减蛋综合征病毒-1976 PCR试剂盒BIRC5/FITC  荧光素标记凋亡抑制因子5抗体IgGN-酰-DL-谷氨酸 BR

CD203c/FITC  荧光素标记CD203c抗体IgGN-酰-L-氨酰 BR

CD203c/RBITC  红色荧光素罗丹明(RBITC)标记抗CD203c抗体IgGN-酰-L-羟脯氨酸 BR

BNP/HRP  辣根过氧化物酶标记兔抗人脑钠素抗体IgGN-酰-D-脯氨酸  98%

CD31/HRP  辣根过氧化物酶标记CD31抗体IgGN-酰-D-酪氨酸 BR

BK channel/FITC  荧光素标记BK通道蛋白抗体IgGL-氨酰盐酸盐 97%

BKCa channels/FITC  荧光素标记钙激活通道蛋白抗体IgGDL-a-氨己二酸 96%

Bmi1/PCGF4/FITC  荧光素标记组蛋白相关Bmi1抗体IgGBoc-L-谷氨酰 98%