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规格 | 50次 | 货号 | YS-P013328 |
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品牌 | YSRIBIO |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
服务流程:
公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 货号 |
榛子源性成分PCR检测试剂盒 | 50次 | YS-P013328 |
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
人信号传导转录激活因子5A(STAT5A)酵母浸粉;酵母粉20号染色体开放阅读框7抗体
人信号传导转录激活因子6(STAT56)核糖核酸酶 A 溶液20号染色体开放阅读框79抗体
人信号传导转录激活因子6B(STAT56B)N,N'-亚甲基双烯酰20号染色体开放阅读框94抗体
人性别决定区Y框蛋白1(SOX1)D-葡萄糖一水21号染色体开放阅读框37抗体
人性别决定区Y框蛋白18(SOX18)十二烷基硫酸钠(分子生物学级)22号染色体开放阅读框15抗体
人性别决定区Y框蛋白2(SOX2)聚乙二600022号染色体开放阅读框13抗体
人性别决定区Y框蛋白3(SOX3)吐温2022号染色体开放阅读框26抗体
人性激素结合球蛋白(SHBG)5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环己盐(X-GLUC)补体C2b链多肽抗体
人胸苷酸合成酶(TS/TYMS)曲拉通X-1002号染色体开放阅读框16抗体
人胸腺白血病抗原(TLA) 胰蛋白胨2号染色体开放阅读框27抗体
人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25) 生物素;D-生物素;维生素 H 辅酶 R磷酸化δ连环蛋白抗体
人胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)甘油磷酸化δ连环蛋白抗体
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)柠檬酸钠二水;柠檬酸三钠二水磷酸化δ连环蛋白抗体
人胸腺肽β10(TMSβ10)酸磷酸化δ连环蛋白抗体
人胸腺肽β4(TMSB4)明胶磷酸化δ连环蛋白抗体
人胸腺五肽(TP5) Bacto酵母浸粉(BD原装)磷酸化δ连环蛋白抗体
榛子源性成分PCR检测试剂盒DOK2 D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体辛酸乙酯 natural, ≥98%, FCC
Phospho-p56Dok2(Tyr351) 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体戊酸乙酯 分析标准品,≥99.7% (GC)
Phospho-p56Dok2(Tyr299) 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体戊酸乙酯 ≥98%, FG
Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体香叶 97%
DPPA2 多能发育相关基因2抗体乙酸香叶酯 96%
DR3/APO3 死亡受体3抗体乙酸叶酯 98%
DR4/APO2 死亡受体4抗体正己 Standard for GC,>99.5%(GC)
Death receptor 5/DR5/CD262 肿瘤调亡素/死亡受体5抗体正己 98%
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