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淀粉检测试剂盒
【原理】
淀粉+(n-1)H2O—AGS→ n D-葡萄糖
D-葡萄糖+ ATP—已糖激酶→G-6-P+ADP
G-6-P+NADP+—G-6 -PDH→6-PG+NADH+H+
【测定条件及步骤】
样品溶液:样品中淀粉浓度在0.05-0.8 g/l
准 确 率:在给定条件下,质控溶液变异在5 %
Hydrolysis 溶液:将10ml R1与50ul R2混合(或30ml/150ul; 20ml/100ul)。2~8℃下可保存4周。
| 试剂空白 | 样品空白 | 样品 |
Hydrolysis 溶液 | 1000 ul | - | 1000 ul |
蒸馏水 | 500ul | 1500 ul | - |
样 品 | - | - | 500 ul |
混合均匀并在60℃温育15分钟 |
继续进行葡萄糖检测(葡萄糖试剂盒):
波长:340 nm 比色杯:1 ㎝
温度:20~37 ℃ 测定时:用水或空气校准;
| 试剂 空白 | 样品 空白 | 样品 |
R1 | 1000 | 1000 | 1000 |
蒸馏水 | 1000 | 1000 | 1000 |
样品 | 300 | 300 | 300 |
混合均匀并读取吸光度值 | A1 | A1 | A1 |
R2 | 20 | 20 | 20 |
混合反应20分后读取吸光度值 | A2 | A2 | A2 |
【计算】
ΔA淀粉 = (A2―A1)样品―(A2―A1)样品空白―(A2―A1)试剂空白
C = (V×MW×ΔA) / (ε×d×v×1000)
C ==0.60425×ΔA [g /l,淀粉浓度]
计算时注意考虑稀释倍数
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