气相色谱和液相色谱仪的区别 液相色谱使用方法

【中国仪器网 使用手册】色谱仪是一种用来进行色谱分离分析的装置，凭借其的分离能力以及准确度较高的分析能力，在食品安全、工业生产、医疗制药等领域都有较为广泛运用，在我们生产生活的各种领域发挥着重要的作用。　　色谱仪的种类有很多，其中气相色谱和液相色谱是较为常见的两种色谱技术，今天我们就气相色谱和液相色谱的异同做个简单的讲解。　　两者的差异　　1. 流动相区别　　正如名字中所提及的，气相色谱的流动相为惰性气体，流动相与组分无亲合作用力，只与固定相有相互作用；而液相色谱的流动项为液体，与组分间有亲合作用。　　2.色谱柱长度的区别　　气相色谱由于载气的相对分析量较低，分子间隙大，故粘度低，流动性好，组分在气相中流动速度快，因此可以增加柱长，以提高柱效，色谱柱长度也在几米到几十米不等；液相色谱的色谱柱通常在几十到几百毫米。　　3.分析样品的选择　　气相色谱一般选择相对分子质量较小、低沸点、易挥发、热稳定性强的样品；液相色谱一般用于分析高沸点、难挥发、热稳定性差、分子质量较大的液体化合物。　　4检测限制　　气相色谱使用时需要将样品在气化室气化，需要较高的检测温度，并且采用的是尖头进样针，液相色谱则不需要对样品气化，常温即可检测，同时采用的是平头进样针。　　两者的共同点　　气相色谱和液相色谱的基本试验方法相似，本质上，都是利用“相似相溶”试验方法，利用色谱柱进行分离。同时在质谱联用领域，两者都可以成为质谱联用仪很好的分离项使用。 有关液相色谱仪的系统组成介绍

液相色谱仪系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相；

被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数；

在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别；

被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪；

数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统；

下面将分别叙述其各自的组成与特点。

进样系统

一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。

这对提高分析样品的重复性是有益的。

输液系统

该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。

高压泵的一般压强为47～44X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时；

可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度；

这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。

流动相贮存器和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变；

包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。

这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。

分离系统

该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。

色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管）；

内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成；

住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）。

固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成；

它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点；

加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样）；

或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。

因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。

例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。

另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。

基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。

根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。

这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。

再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C；

通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。