体视荧光显微镜的常见使用方法

　　体视荧光显微镜是显微镜的一种，这种显微镜以紫外线为光源，通过观察被测物的荧光图像对物体作出判断。目前，荧光体视显微镜是活体动物体内荧光成像技术的核心技术，被用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。体视荧光显微镜是生物、工业检测等领域进行定性和定量研究的可靠工具之一，其常见操作方法和注意事项具体如下。

　　一、体视荧光显微镜的使用方法

　　1.将材料片放在载物台上，开启荧光显微镜稳压器.然后按下启动组点燃紫外灯，需要注意的是，点燃紫外灯后十五分钟内不能关闭，关闭紫外灯后三分钟内不得再启动。

　　2. 将激发滤光片转至v，分色片调到v，选用495或475nm阻挡滤光片;选用uvFL40、uvFL100荧光接物镜镜检。

　　3. 在玻片上加无荧光油，依次用“40x"“100 x"调焦镜检，呈现荧光。

　　4. 因荧光物质受紫外光照射时随时间的增长荧光逐渐变弱，因此镜检时应经常变换视野。

　　二、注意事项

　　(1)严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序。

　　(2)应在暗室中进行检查。进入暗室后，接上电源，点燃超高压汞灯5～15min，待光源发出强光稳定后，眼睛适应暗室，再开始观察标本。

　　(3)防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜。

　　(4)检查时间每次以1～2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱;标本受紫外线照射3～5min后，荧光也明显减弱;所以，多不得超过2～3h。

　　(5)荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节　省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。

　　(6)标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发。

　　(7)荧光亮度的判断标准： “-"—无或可见微弱荧光。“+"—仅能见明确可见的荧光。“++"—可见有明亮