行业产品

  • 行业产品

上海谷研实业有限公司


当前位置:上海谷研实业有限公司>技术文章>处理动物血清elisa试剂盒的六大重点标本
技术文章

处理动物血清elisa试剂盒的六大重点标本

阅读:98发布时间:2017-10-19

处理动物血清elisa试剂盒的六大重点标本:
一、尿液、唾液 
    1000×g离心20min,取上清即可检测。但由于ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。
    注意:还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,从而导致假阴性的结果。
    
二、细胞裂解液
    ① 吸去培养板内的培养基,用*消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
    ② 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
    ③ 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
    ④ 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
    ⑤ 4℃10000×g离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
   
三、细胞培养上清
    取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
四、组织匀浆液
    ① 将组织样本用PBS(0.01M, PH 7.4)冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
    ② 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
    ③ 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆)
    ④ 吸取匀浆液到离心管,4℃5000×g离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

五、血清
    用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃放置一个晚上,使血清析出。(将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出)4℃1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
    注意:采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。

六、血浆
    用含抗凝剂的*或离心管采集血液标本,动物血清elisa试剂盒标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
*    25克        *
溴酚蓝钠    5克    2~8°C    *
溴酚蓝    100克        进口/国产
溴代十六烷    250毫克    2~8℃    进口/国产
溴百里香酚蓝    5克    2~8°C    *
溴百里酚蓝钠盐    25克        *
新戊二醇    5克    RT,避光    *
新生牛血清    5克    RT    *
新生霉素增菌肉汤    100克        进口/国产
新生霉素    100克        *
锌试剂    1克    RT    *
锌片    5克    RT,避光    *
锌粒    100毫升        *
动物血清elisa试剂盒

 


仪表网 设计制作,未经允许翻录必究 .      Copyright(C) 2021 https://www.ybzhan.cn,All rights reserved.

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪表网对此不承担任何保证责任。 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

登录 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~