上海谷研实业有限公司
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阅读:101发布时间:2017-05-18
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人白介素8(IL-8)ELISA试剂盒检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心法。用抗人IL-8抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的IL-8
会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入*化的抗人IL-8抗体和辣根过氧化物酶标
记的亲和素。抗人IL-8抗体与结合在包被抗体上的人IL-8结合、*与亲和素特异性结合而形
成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入发光底物混合液,发光底物在辣根过氧化物酶的催化下
发出荧光,用化学发光免疫分析仪测定化学发光值(RLU),IL-8浓度与化学发光值之间呈正相
关,通过绘制标准曲线求出标本中IL-8的浓度。
人白介素8(IL-8)ELISA试剂盒样品收集:
1. 血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集
血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2. 血浆:抗凝剂*使用EDTA.Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可
检测。避免使用溶血,高血脂样品。
3. 细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞
会影响测量结果),称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量
体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记
录。*在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂
解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分
钟,取上清检测。
5. 其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测
6. 样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7. 样品收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融,
1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。
8. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品zui高值,请根据人白介素8(IL-8)ELISA试剂盒实际情况,做适当倍数稀释(建议先
做预实验,以确定稀释倍数)。
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