上海一研生物科研有限公司
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超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌产品特点:离心柱法;安全:无需使用二甲苯去蜡,具有安全、有效的*去蜡方法;高质量:提取的RNA纯度高,得率高;方便:操作简单、快捷,无需*类有毒试剂,无需乙醇沉淀。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的实验条件,*的设备,高素质的实验人员,保证您超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌的实验得以良好的完成。我们承诺一对一的专门服务,您可以全称参与了解实验进程。
超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌的详细介绍:
超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌服务流程
1)客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质
超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整性
货期
3-5个工作日
超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
一般的western实验都需要进行内参设置。具体校正的方法就是将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除,得到每个样品目的蛋白的相对含量。然后才进行样品与样品之间的比较。
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解(glycolysis)过程中的关键酶。除了在胞质中作为糖酵解的酶以外,有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程,包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复。一些生理因素,诸如低氧(hypoxia)和尿糖(diabetes),可以增加GAPDH在特定细胞中的表达。GAPDH存在于几乎所有的组织中,以高水平持续表达。
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成.
英文名称 Anti-GPR97
中文名称 G蛋白偶联受体97抗体
别 名 EGF-TM7-like; G protein coupled receptor 97; G-protein coupled receptor PGR26; GPR97; GPR97_HUMAN; Pb99; PGR26; Probable G-protein coupled receptor 97; GPCR GPR97.
浓 度 1mg/1ml
hospho-LSP1 磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白试剂盒
LSP1 白细胞F肌动蛋白结合蛋白试剂盒
LZTFL1 *拉链转录因子样1试剂盒
Laminin B2 gamma 1 层粘连蛋白B2γ1试剂盒
Phospho-LAT 磷酸化T细胞活化连接蛋白试剂盒
Phospho-LAT 磷酸化T细胞活化连接蛋白试剂盒
LRP1/CD91 低密度脂蛋白受体相关蛋白1试剂盒
LPCAT2 磷脂酰基转移酶2试剂盒
LRRFIP2 LRRFIP2蛋白试剂盒
LRRFIP1 巨噬细胞调控相关蛋白LRRFIP1试剂盒
LH beta 促黄体生成素试剂盒
LIMS1 整合素和生长因子样蛋白1试剂盒
LLGL2 相似肿瘤抑制基因HUGL试剂盒
LAMTOR1 LAMTOR1蛋白试剂盒
LDB3 LIM结构域结合蛋白3试剂盒
LIMS2 ILK结合蛋白LIMS2试剂盒
LNK 淋巴细胞特异性接头蛋白试剂盒
超级杂交液 ( 芯片 )10mL品牌LILRB2 细胞表面免疫球蛋白样转录因子4试剂盒
LY6G6F 淋巴细胞抗原试剂盒6重复位点蛋白G6F试剂盒
Leupaxin 桩蛋白试剂盒
LRPAP1 脂蛋白受体相关蛋白/低密度脂蛋白相关蛋白的相关蛋白1试剂盒
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