ELISA试剂盒在酶联固相免疫试验中，尤其在简介ELISA法中，经常会碰到阴性本底的问题。主要是本底过高和不同标本的本底值差异较大。本底或称布景，是ELISA中的非特异性显色。底物未经过酶效果而呈现的色彩称为空白。底物液如制造不当会呈现必定的空白值。这个空白值只需不太高（A＜0.05），可从个测定值中减除，并不影响试验成果。这儿研讨的是不含待测抗原或抗体的阴性标本在ELISA中呈现的本底。从理论上讲，只有阳性标本终究才能引出显色反响，在以下状况会呈现本底。
固相载体的吸附
在酶免疫测定中，ELISA试剂盒的特点是使用固相载体作为分离游离和结合的酶结合物的手法。固相载体与吸附在其上的抗原会抗体构成固相抗原或固相抗体，即免疫吸附剂（Immu-nosorbent）。一般所用的固相载体聚苯乙烯其外表主要是疏水基团，经过疏水键与蛋白质结合。之中吸附式物理性的非特异性吸附，尽管蛋白质的分子量、等电点、浓度等对吸附的量有必定的影响，但总的来说各种蛋白质均能吸附在聚苯乙烯载体的外表。因而除在包被时有目的地使抗原或抗体吸附在载体上，在ELISA各个过程中均有可能发生搅扰物质的吸附，使终究发生与受检抗原-抗体反响无关的显色，这是构成本底的主要原因。
