ELISA试剂盒顶用ELISA检测时（以检测弓浆虫IgM为例），用无特异抗体的血清稀释阳性血清制作规范曲线，挑选的稀释度应很容易差异阳性和暗影成果的稀释度。每次实验均应同时使用阴性对照血清，可挑选强阳性的血清作为规范对照血清，并可自己设定其为100单位（免疫酶单位-EIU）。这样每次实验均参阅阳性血清成果断定每份血清的相对抗体水平，其核算公式如下：标本值-阴性对照值 阳性对照值-阴性对照值
抗体水平（样本）=（规范值-阴性对照值）/（阳性对照值-阴性对照值）×EIU
用在450nm检测的吸光度核算，zui终的值为EIU。
如果国内或上的规范抗体和检测办法，那么所用的参阅血清应与规范血清对照实验进行规范化，但如果所用的检测办法不同，规范化时就存在不同，不同的办法检测出的成果不能反映出参阅血清和规范血清之间的不同。
ELISA试剂盒自己制备的规范参阅血清应确保质量，并要有满足的血清，小量分装存储与-20℃，或冻干存储。规范血清检测的吸光度值应确保在必定范围内，以便检测每次实验的吸光度值的改变。
