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阅读:165发布时间:2017-10-13
ELISA试剂盒小珠一般为直径0.6cm的圆球,外表经磨砂处理后吸附面积大增加。
聚苯乙烯为塑料,可制成各种方式,在测定进程中,它作为载体和容器,不参加化学反应,加之它的报价,所以被广泛选用。
zui常用的载体为微量反应板,于ELISA测定的产品也称为ELISA板,用的标准板形是8×12的96孔式。
为便于作少量标本的检查,有制成8联或l2联孔条的,放入座架后,巨细与标准ELISA板一样。
聚苯乙烯载体的形状首要有三种:小试管、小珠和微量反应板。小试管的特征是还能兼作反应的容器,终究放入分光光度计中比色。
作为ELISA固相载体,聚氯乙烯板的特征为质软板薄,可切开,价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。
ELISA板的特征是可以一起进行许多标本的检查,并可在特定的比色计上活络读出效果。
如今已有多种自动化仪器用于微量反应板型的ELISA检查,包括加样、洗刷、保温、比色等进程,对操作的标准化极为有利。
超卓的ELISA试剂盒板应该是吸附功用好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间功用邻近。
ELISA试剂盒免疫酶技术的首要试剂为固相的抗原或抗体、酶符号的抗原或抗体和与符号酶直接有关的酶反应底物。
可作固相载体的物质许多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的功用,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保存正本的免疫活性。
因而每一批号的聚苯乙烯制品在运用前须检查其功用。
常用的检查方法为:以必定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔内参加恰当稀释的酶标抗人IgG抗体,保温后洗刷,加底物显色,间断酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。
操控反应条件,使各读数在0.8支配。核算全部读数的均匀值。
全部单个读数与均匀读数之差应小于10%.与聚苯乙烯相似的塑料为聚氯乙烯。
在哪一种载体上阳性效果与阴性效果差异zui大,这种载体就是这一ELISA测定的zui合适的固相载体。
聚氯乙烯对蛋白质的吸附功用比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。
为对比不一样固相在某一ELISA测定中的好坏,可用以下方法加以查验:用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。
ELISA试剂盒将它们分别进行一系列稀释后,在不一样的固相载体上按预定的ELISA操作进程进行测定,然后对比测定效果。
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