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阅读:150发布时间:2017-11-15
ELISA试剂盒的处理样本是保证ELISA检查的性和性的*步,下面就简略介绍一下不一样类型的样本的处理方法。
血清
血清是zui常用于ELISA检查的一类样本,处理也比较简略。
将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。避免运用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、*和*等,检查时还应仔细阅览试剂盒说明书,检查试剂盒是不是对抗凝剂有特殊要求。
用无热原、无内毒素的试管或离心管搜集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃放置一晚,使血清分出。
4℃ 1000×g离心20分钟,仔细搜集上清。
一起也应避免细菌污染,因为菌体内可能富含内源性的HRP然后致使检查的假阳性。
一般我们可用于ELISA检查的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不一样类型的检查样本前期的处理方法是不一样的。
ELISA试剂盒血浆
用含抗凝剂的*或离心管搜集血液标本,标本搜集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。
为了保证检查的性,保存于-20℃或-80℃的样本在1~6个月内检查;
4℃保存的样本应在1周内进行检查。其他,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会按捺HRP的活性,然后致使假阴性的效果。
细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。
尿液、唾液等其他液体生物样本
1000×g离心20min,取上清即可检查。
ELISA实验成功的条件是样本的处理加上实验途中的操作,的处理样本是保证ELISA检查的性和性的*步。
总的来说,因为ELISA只能检查可溶性蛋白的含量,所以应保证全部样本均为澄清的液体,沉积或悬浮物都应离心去掉。
主张将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。
ELISA试剂盒采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会开释具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为符号的ELISA检查中会有非特异性的显色,而致使检查的不性。
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