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技术文章

如何有效避免ELISA试剂盒的实验误差

阅读:155发布时间:2018-1-4

ELISA试剂盒查验技师应具有从事试验室操作的基本素质和实践经验。
能娴熟操作试验仪器、器械,具有必定总结和剖析疑问的才调,对试验中呈现的意外情况能及时妥善处理。
怎么减小ELISA试验中的过错呢?要从天然要素(试剂安稳性、率、仪器精密度)和人为要素(操作者)两个方面下手:
运用校对过的微量移液器,打扫天然过错。移液器与否对定量检查尤为首要。
值得改善的本地,重复试验断定建立后才调改善,比如洗板次数的把握等。
加样要、敏捷。化学理论标明,生成物的量与反响物的量成正有关。
评估试剂的实用性。
试剂的安稳与否,对率的凹凸到头首要。
ELISA试剂盒试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品重复对比试验,断定试剂契合央求后方可运用。
操作前仔细阅读说明书。
严峻依照说明书央求进行规范化操作。
ELISA试剂盒不一样批号的试剂不行混用。
加样不,酶生成物的量不能断定,直接影响显色作用。
显色的深浅及A值的测定与参加显色剂和间断液的量有关,所以加样应慎重。
央求在必定时刻内加样结束的试验,如果加样缓慢,便呈现过错,并且试剂长期显露在外,特别室温过高时,保存期会缩短甚至失效。
显色时刻过短,参加间断液反响间断后,底物联络物的量过少,易呈现假阴性。
逾越显色央求时刻后显色,应判为假阳性,这或许与试剂自身有关。
洗板不*,酶联络物本底显色会呈现假阳性。
洗刷液要新鲜,现用现配,陈腐的洗刷液会呈现本底增高现象,也或许呈现假阳性。
严控反响时刻。
反响时刻过长,酶失活;反响时刻过短,酶联络物不能与血清中的微生物抗原抗体充沛联络,生成物构造懈怠不强健,简略洗掉,都或许构成假阴性。
严峻把握显色时刻。
加显色剂后当即显色,不行报阳性,这或许是本底显色的作用。
ELISA试剂盒留神试剂保存期,过保存期的试剂不能运用。

 


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