ELISA试剂盒常用的盐析剂是硫酸铵，其溶解度大、价格便宜。硫酸铵沉积蛋白质的才能很强，其饱和溶液能使大多数的蛋白质沉积下来。对酶没有损坏效果。
pH的操控：应从酶的溶解度与安稳性两个方面思考，在酶等电点时其溶解度zui小易沉积，但有些酶再等电点时安稳性较差，因此要挑选pH值.通常请求在酶zui安稳的pH值的前提下再思考酶沉积的pH值。在操作中一旦断定pH值后，在增加硫酸铵之前甲酸或碱调理好酶液的pH值，要尽量避免溶液pH值的波动避免损坏酶的安稳性。在增加硫酸铵时要留意拌和，并留意硫酸铵的参加速度，通常是由少到多，缓慢参加，硫酸铵尽可能磨成细粉。
温度的操控：有些酶在较高温度下安稳性能较好，可在常温下进行盐析操作，而对于大多数酶，尽可能在低温下操作。
酶液的净置：加完硫酸铵后，酶液要静置一段时间，使酶蛋白*沉积下来，酶静置后，就不要再加以拌和。
有机溶剂挑选：可用于酶蛋白沉积的有机溶剂包含醇类物质等，如甲醇、乙醇、异丙醇。乙醇的亲水性能较好，可防止蛋白质的变性，酶蛋白在其间的溶解度也较低。
有机溶剂沉积操作：有机溶剂通常都使蛋白质变性，当温度较高时变性蛋白质分子就会成为持久失活。因此用有机溶剂处理时在0℃以下进行。用有机溶剂沉积得到的酶蛋白不要放置过久，要赶快加水溶解。
聚合物絮凝剂沉积 聚合物絮凝剂，如葡聚糖和聚乙二醇，与酶分子抢夺水分子，具有脱水效果使酶沉积。聚乙二醇作为一种沉积剂的长处是在水溶液中，其浓度可到达50%，浓度为6%-12%的蛋白质大都能够沉积下来。这种试剂不需要低温操作，而且对蛋白质的安稳还有必定的维护效果。聚乙二醇不会被吸附，故在离子交换吸附前不必去掉。
酶和别的蛋白质都会构成金属盐，其溶解度较低。用金属离子沉积的缺陷是酶与金属离子相互效果后，可逆改变较差，尤其是用巯基衍生物，它的]金属离子会催化酶变性而失活。
用*可挑选性去掉核酸，从而使胞内酶沉积出来。*盐（浓度为0.5-1.0mg/mg蛋白质）对于挑选性沉积核酸的效果比锰离子还要好，酶不易失活。
在蛋白质纯化进程中首要用到的膜别离技术多为超滤。在静压效果降低溶液经过孔径十分小的滤膜，使溶液中分子量较小的溶质透过薄膜，而大分子被截留于膜表面。大多数超滤膜是由一层十分薄的功用膜与较厚的支持膜在一起而构成的。功用膜决定了膜的孔径，而支持膜供给机械强度以反抗静压力。超滤浓缩的长处是：操作条件温文，无相改变，对生物活性物质没有损坏。
超滤体系首要由料液贮罐、泵、超滤器、透过液搜集罐构成，料液经泵打入超滤器，水及低分子量物质排出超滤器外，被浓缩的料液在料液贮罐、泵、及超滤器中循环。当料液浓缩至必定的倍数后即可作为进一步处理的浓缩料液。
ELISA试剂盒超滤应用于蛋白质类物质的浓缩和脱盐进程中时应留意以下疑问：，在超滤循环进程中，因为泵和叶轮与料液的摩擦放热效果，料液的温度会逐步增加，会构成蛋白质分子的丢失。因此，料液贮罐应加冷却体系，并装置主动测温及操控体系。第二，某些酶的辅助因子散失为疑问：一些酶富含辅助因子，其分子量小，超滤时易从透过液中排除去，因此在超滤前或超滤后要增加必定浓度的的辅助因子。
还可将超滤与亲和层析相以进步别离纯度。其工作原理是：当溶液中欲被别离的蛋白质不受阻止地经过超滤膜的孔隙时，如果在膜的一侧着亲和配基，该蛋白质就会与配基因此结聚在膜的这一侧。不与配基的别的物质就将穿过孔而被带走。再用适合的洗脱剂将该蛋白质洗脱下来，洗脱液用于进一步的别离纯化。
蛋白质较易吸附与气液界面，这有利于其构造的安稳。泡沫别离进程是：蛋白质从主体溶液中扩散到气液界面，该进程可能是可逆的也可能是不可逆的；分子发作重排，通常以为在空气-水界面会构成两种类型的膜，一种是稀膜，另一种是浓膜，可能会发作由多个分子集合在一起的景象。在气液界面构成的蛋白质膜能够是单层的也能够是多层的。膜的类型取决于主体溶液及气液界面上蛋白质的特性、构造和浓度。
ELISA试剂盒泡沫别离的意图，一方面进步酶蛋白的富集率（泡沫中蛋白质的浓度/开始溶液中蛋白质浓度），另一方面进步酶蛋白的提取率（泡沫中蛋白质的提取率/开始的蛋白质质量），或使多组分混合物中某一组分的分配系数zui大。
