1.ELISA试剂盒将抗原抗体反应固相化：即试验中的包被环节，使抗原或抗体吸附于固相载体表面。其机制可能是聚苯乙烯表面间的疏水基团可以无选择性地吸附蛋白分子。Elisa试剂盒此物理性吸附不损坏蛋白分子结构，Elisa试剂盒坚持其生物学特性和免疫学活性；
2.封闭：固相吸附蛋白对错特异性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才干，为了确保抗原抗体反应的特异性，因而，包被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭。通常以为牛血清白蛋白是zui为抱负的封闭剂，也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清代替。
3.抗原抗体反应：ELISA试剂盒抗原或抗体在恰当的介质下可进行特异的抗原抗体反应。
4.酶反应：酶可以通过共价键与抗原或抗体衔接构成联络物，当抗原抗体反应的时分，被查看靶政策中也联络了酶分子。
5.底物反应：联络在抗原抗体中的酶分子，Elisa试剂盒可以促进底物发作颜色反应，查看人员可以裸眼查询，可以通过颜色来断定是不是有免疫反应的存在，通过颜色的深浅判别标本中相应抗原或抗体的含量，也可借用酶标仪在恰当的波长读取吸光度值。
ELISA试剂盒的基本原理便是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应，并通过酶催化底物发作化学改变将抗原抗体反应通过颜色的方式显现出来。
