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阅读:105发布时间:2017-8-15
ELISA试剂盒酶符号抗体方法主要有两种:戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。
1、戊二醛交联法
戊二醛是一种双功用团试剂,它可以使酶与蛋白质的氨基经过它而联接。碱性磷酸一般用此法进行符号。交联方法分一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接参加酶与抗体的混合物中,反应后既得酶符号抗体。
ELISA试剂盒中常用的酶一般都用此法交联。它具有操作简洁、有用(结合率达60%~70%)和重复性好等长处。缺陷是交联反应是随机的,酶与抗体交联时分子间的份额不严厉,结合物的巨细也不均一,酶与酶,抗体与抗体之间也有可能交联,影响效果。在两步法中,先将酶与戊二醛效果,透析除掉剩余的戊二醛后,再与抗体效果而构成酶标抗体。也可先将抗体与戊二醛效果,再与酶联合。
2、过碘酸盐氧化法
ELISA试剂盒本法只适用于含糖量较高的酶。辣根过氧化物酶的符号常用此法。反应时,过碘酸钠将HRP分子表面的多糖氧化为醛基很活泼,可与蛋白质上的氨基构成Schiff氏碱而结合。
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