试剂盒用于测定人血清、血浆、安排及相关液体样本中的含量或活性。注意事项及操作流程如下：
一、ELISA试剂盒操作流程：
1、包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚乙 烯板的反响孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗刷缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗刷，下同)。
2、加样：加必定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反响孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗刷。(一起做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反响孔中，参加新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗刷。
4、加底物液显色：于各反响孔中参加暂时制造的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、停止反响：于各反响孔中参加2M硫 酸0.05ml。
6、成果断定：可于白色布景上，直接用肉眼调查成果：反响孔内色彩越深，阳性程度越强，阴性反响为无色或极浅，根据所呈色彩的深浅，以“+”、“-”号表明。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规则的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。办法二用于检测不知道抗体的间接法：用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗刷3次。
加必定稀释的待检样品(不知道抗体)0.1ml于上述已包被之反响孔中,置37℃孵育1小时,洗刷。(一起做空白、阴性及阳性孔对照)
于反响孔中，参加新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗刷,zui终一遍用DDW洗刷。
二、ELISA试剂盒注意事项：
1、一切样品，洗刷液和各种废弃物都应按传染物处理；
2、底物请避光保存；
3、浓洗刷液可能会有结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果；
4、请每次测定的一起做规范曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于规范品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释必定倍数（n倍）后再测定，核算时请zui终乘以总稀释倍数（×n×5）；
5、严格按照说明书的操作进行，实验成果断定有必要以酶标仪读数为准；
6、各步加样均应运用加样器，并常常校对其准确性，以避免实验误差。一次加样时刻控制在5分钟内，如标本数量多，引荐运用排枪加样；
7、ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存；
8、封板膜只限一次性运用，以避免穿插污染。
更多ELISA试剂盒详情请咨询上海机纯生物
