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公司动态

ELISA试剂盒快速检测样本预处理

阅读:35发布时间:2017-10-13

1.破坏
ELISA试剂盒一般用磨粉机、粮谷破坏机、绞肉机等将块状的或颗粒较大的动植物样本细化的进程。意图是增大样本表面积,有利于待测组分的提取。
2.提取
提取是使待测组分与样品别离的进程。
ELISA试剂盒提取的办法较多,有静置法、匀浆法、振动提取法、设备提取法等。现将常用的提取办法扼要介绍如下:
(1) 安排捣碎法是食物检测中zui常用的一种提取办法,将经破坏的样品与等量或数倍于其体积的溶剂混合,经过高速旋转的叶片(100r/min)将样本中的待测组分与溶剂有充沛的触摸机会,使待测组分被提取出来。该办法提取功率高。使用的首要设备有高速安排捣碎机、安排匀浆机、高速均质器等。在农药残留量剖析中简直都选用安排捣碎法提取,每次提取的时刻约为3~5min,次数1~2次。在本操作进程中,需求留意以下事项:试样和溶剂的总体积不应该超过捣碎钵容积的2/3,避免内容物溅起;捣碎机的旋转速度,一般是先慢后快;整个操作要在通风杰出的环境下进行。
(2) 索氏提取法也是食物检测中zui常用的提取办法之一。此法经过设备——索氏提取器提取待测组分,提取功率高,操作简洁,但提取时刻长。选用索氏提取法时,应充沛考虑待测组分的热稳定性。
(3) 振动法在食物检测中也较为常用。行将装有试样和提取溶剂的具塞容器,放在振动机上,进行往复振动或旋转振动,使容器内的提取溶剂与试样充沛触摸,以深化到样本安排内部提取待测组分。一般情况下,振动10-30min,重复提取2~3次。据报道,振动法与安排捣碎法和索氏提取法的提取功率适当。日本的食物剖析办法中简直都选用振动法。
(4) 超临界流体萃取仪、强化溶剂萃取仪是近二十年来发展起来的提取技能。别的还有一些辅佐手段,如超声波辅佐提取、微波辅佐提取等。
3.净化
经过提取的待测组分,提取物中一般含有与该组分结构类似的杂质,将待测组分与杂质别离的进程,称为净化。
该进程是样本前处理的技能难点,也是关系到检测成果的真实性及检测办法可靠性的重要进程。首要办法有固相萃取法、液-液分配法、化学处理法、扫集共蒸馏法、低温冷冻净化法、前置色谱柱净化法等。
固相萃取法是现在应用zui多的净化办法之一,经过吸附柱、分配柱、凝胶浸透柱、薄层板等完成,其原理是样本的待测组分在层析柱中吸附剂上被吸附与被解吸的反复进程。常用的吸附剂有佛罗里硅土、氧化铝、活性炭、硅胶、氧化镁和纤维素等。
液-液分配法也是一种非常常用的净化办法,其原理是使用待测组分在一组互不相溶的溶剂对内的分配系数不同,经过反复多次分配,使待测组分与杂质别离,以到达净化意图。常用的溶剂对有乙腈提取液的正已烷分配、乙腈提取液的分配、丙酮提取液的石油醚分配、丙酮提取液的二氯甲烷分配等。
4.浓缩
ELISA试剂盒因为净化进程所引进的溶剂,可能会下降待测组分的浓度或不适宜直接进样,需求去除部分或全部溶剂及进行溶剂变换,此进程为浓缩或富集。首要经过旋转蒸发器蒸干或惰性气体(如氮气)吹干除掉溶剂。

 


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