ELISA试剂盒顶用的蒸馏 水或去离子水，ELISA试剂盒包含用于洗刷的，应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定（如血清 、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。
血清标本可按惯例办法采集，应留心防止溶血，红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为符号的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久，其间的可发作聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。本文将叙说板式ELISA试剂盒各个操作进程的留心关键，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特别仪器合作使用，严厉遵循划定操作，必能得出正确的成果。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留心不可溅起，不可产愤慨泡。有此测定（如间接法ELISA）需用稀的血清，可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。
在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，ELISA试剂盒加酶结合物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质局部浓缩，散布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝结、缩短后即可获得。也可在板孔中参加稀释液，再在其参加血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以确保混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超越一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本非常广泛，体液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其间某种抗体 或抗原成份，ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。
ELISA试剂盒的操作因固相载体的构成不同而有所差异，国内医学检修一般均用板式点。除特别情况外，在医学检修中均以血清作为检测标本。加酶结合物使用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液进程敏捷完成。如有细菌污染，ELISA试剂盒菌体中可能含有内源性HRP，也会发作假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴，以发作穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加样。的试剂，杰出的仪器和准确的操作是确保ELISA试剂盒检测成果正确牢靠的必要条件。
