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人源细胞在实际操作中,冻存的细胞要进行复苏,复苏之后再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。进行细胞复苏的操作步骤如下:
(1)佩戴眼镜和手套,从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。
(2)迅速放入38℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其*融化,然后在无菌下取出细胞。
(3)在1000r/min速度下离心5~10分钟,弃去上层液,加入适量培养液后接种于培养瓶中,接种浓度1×109/L,置37℃温箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养,观察生长情况。若细胞密度较高,及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中,并加入培养基贴壁培养12~24小时后,充去上清,换入新鲜培养基继续培养。
按照以上步骤复苏的冻存人源细胞存活率高,生长及形态良好。
100923 1,2-dibutoxyethane 127-40-2 Diethylmalonylurea
100924 乙二醇二丁醚 fludrocortisone difluoroacetic acid
100925 112-48-1 氟氢可的松 difluoromethane
100926 1,10-Decanediol 127-31-1 Diheptyl sulfide
100927 1,10-癸二醇 2,2-Dichloropropionic acid sodium salt Dihydrokavain
100928 112-47-0 2,2-二氯丙酸钠 dihydronicotinamide-adenine dinucleotide, disodium salt
100929 Undecylenic aldehyde 127-20-8 dihydroterpineol
100934 十一碳烯醛 N,N-Dimethylacetamide Diiodomethane 人源细胞
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