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人源细胞复苏的操作步骤

时间:2017/11/9阅读:135
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人源细胞在实际操作中,冻存的细胞要进行复苏,复苏之后再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。进行细胞复苏的操作步骤如下:

(1)佩戴眼镜和手套,从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。

(2)迅速放入38℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其*融化,然后在无菌下取出细胞。

(3)在1000r/min速度下离心5~10分钟,弃去上层液,加入适量培养液后接种于培养瓶中,接种浓度1×109/L,置37℃温箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养,观察生长情况。若细胞密度较高,及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中,并加入培养基贴壁培养12~24小时后,充去上清,换入新鲜培养基继续培养。

按照以上步骤复苏的冻存人源细胞存活率高,生长及形态良好。
100923    1,2-dibutoxyethane    127-40-2    Diethylmalonylurea                    
100924    乙二醇二丁醚    fludrocortisone    difluoroacetic acid                    
100925    112-48-1    氟氢可的松    difluoromethane                    
100926    1,10-Decanediol    127-31-1    Diheptyl sulfide                    
100927    1,10-癸二醇    2,2-Dichloropropionic acid sodium salt    Dihydrokavain                    
100928    112-47-0    2,2-二氯丙酸钠    dihydronicotinamide-adenine dinucleotide, disodium salt                    
100929    Undecylenic aldehyde    127-20-8    dihydroterpineol                    
100934    十一碳烯醛    N,N-Dimethylacetamide    Diiodomethane          人源细胞

 

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