人源细胞实验结果误判原因

人源细胞提供的对实验结果判定说明是接种细菌于37℃培养24h，滴加V-P甲、乙液后在30min内观察结果，变红色为实验阳性，不变色为阴性。然而在实际工作中，此方法会造成一些实验结果的误判，并不是所有的细菌都适用上述判定方法。
V-P实验常用于细菌检测，可检验细菌利用葡萄糖产生中性乙酰甲基甲醇的能力，在碱性环境下，乙酰甲基甲醇被空气中氧气氧化成二乙酰，二乙酰与培养基内蛋白胨中*所含有的胍基反应可生成红色化合物。
蜡样菌V-P培养基培养24h，滴加甲、乙液后30min内呈现阳性，证明试验用V-P培养基无质量问题。单增菌V-P培养基分别于30℃和37℃培养24h、48h、72h、96h，实验结果如下表。通过实验我们发现两种现象。其一，单增菌培养的时间短，出现阳性结果慢，随着培养时间延长，阳性结果出现的时间缩短。其二，48h内，单增菌于30℃培养要比在37℃培养阳性结果出现的快些。
究其实验原理，V-P实验显色不同于糖醇类培养基颜色变化，因其中所含指示剂变化特别灵敏。该实验zui终出现红色物质与二乙酰的含量有直接关系，二乙酰含量大，它与胍基生成的红色物质就多，观察到培养基显红色的速度就快，二乙酰含量少则反之。试验中，随着培养时间的延长，单增菌利用葡萄糖生成的乙酰甲基甲醇含量越来越多，乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰的含量也就越来越多，从而阳性结果显现的时间随之缩短。相对于37℃，单增菌于30℃培养更适宜生长，并且在相同的培养时间内，其利用葡萄糖生成的乙酰甲基甲醇含量更多些，尤其48h内表现得更为突出。
从人源细胞大量的实际工作中发现，有些细菌的生化实验不应*按照试剂盒说明书的方法去做，应参考其生物学特点，在必要时做出适当的调整，才能得到更加可信、满意的实验结果。正如上述实验，若按试剂盒提供的结果判定说明，培养72h内的阳性结果均超过30min，理应判定为阴性，而单增菌更适宜于30℃生长，且生长缓慢，从而V-P实验需要适当的延长培养时间，4h内观察结果为宜，所以不能轻易地判定为阴性。
40957-83-3     Glycitein    黄豆黄素标准品    15mg
40246-10-4     Glycitin    黄豆黄甙标准品    15mg
33996-58-6     Levetiracetam Racemic Mixture     *外消旋混合物标准品    15mg
    N-Demethylazithromycin    n-去甲基*标准品    15mg
    Neotame Related Compound A    纽甜相关物质A标准品    15mg
    Open Ring Aztreonam    开环*标准品    15mg
6233-83-6     Oxytocin Identification    羟可待酮鉴别标准品    15mg
    Piroctone Related Compound A    吡罗克酮相关物质A标准品    15mg
206184-49-8     Tenofovir     泰诺福韦标准品    15mg
    Tiagabine Related Compound A    噻加宾相关物质A标准品    15mg
3569/10/6    Valerenic Acid    缬草烯酸标准品    15mg
32911-62-9     Withanolide A    睡茄交酯 A标准品    15mg
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