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细胞免疫荧光简单实验步骤

时间:2017-4-27阅读:126
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细胞免疫荧光简单实验步骤如下:

1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭:37度,20分钟

7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净,3min*5次

9.二抗 37度小于一小时

10.37度 PBS洗净,3*5min

凉干封片(封闭液PH8.5)

不管采用何种方法,在使用PBS缓冲液漂洗时,都要漂洗干净并且要测下pH值,可以使用PBS多清洗几次,也可以延长PBS清洗时间,如果结果背景较高可以延长漂洗的次数和时间。

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