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126次细胞免疫荧光简单实验步骤如下:
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.
2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟
3.PBS洗净:3min*3
4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS
5.PBS洗净:2*5min
6.羊血清封闭:37度,20分钟
7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时
8.4度 PBS洗净,3min*5次
9.二抗 37度小于一小时
10.37度 PBS洗净,3*5min
凉干封片(封闭液PH8.5)
不管采用何种方法,在使用PBS缓冲液漂洗时,都要漂洗干净并且要测下pH值,可以使用PBS多清洗几次,也可以延长PBS清洗时间,如果结果背景较高可以延长漂洗的次数和时间。
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