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悬浮细胞的染色技术参数

时间:2017-5-23阅读:108
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悬浮细胞的染色:

(1)收获正常和诱导凋亡的细胞(0.5~1′106),PBS洗2次,1000rpm′10min。

(2)3%多聚甲醛冰浴10min,PBS洗2次,1000rpm′10min。

(3)加入PBS-T溶液,37°C孵育15min,PBS洗2次,1000rpm′10min。

(4)加入200ml胎牛血清,室温反应30min。

(5)加入5ml FITC标记的TFAR19单抗(终浓度为1:40),4°C反应30min

(6)荧光细胞洗液洗2次,1000rpm′10min。

结果观察:将细胞沉淀滴片,荧光显微镜及共聚焦激光显微镜下观察TFAR19在细胞中的定位。同时用流式细胞计定量检测TFAR19蛋白的平均荧光强度。

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