人脂肪间充质干细胞传代说明

人脂肪间充质干细胞传代说明
备注1：由于人间充质干细胞*培养液是低血清培养液，需要提前取少量人间充质干细胞*培养液，额外加入10% FBS，作为*消化终止液使用。 
备注2：细胞不能太密集，否则容易分化。 
1，待细胞长到70%-80%满时进行传代（见备注2），一般3-5天，具体视细胞生长情况而定。 ,
2，吸除废液。 
3，用PBS（不含钙镁离子）轻轻冲洗一遍。 
4，加入1-2 ml的0.05% *（含EDTA）至培养瓶，轻轻晃动，使*覆盖底面，置于37℃培养箱内消化细胞。 
4，在显微镜下观察，直至细胞层全部脱落（一般需要1-2 min）。 
5，加2 ml *消化终止液（即备注1中：额外加入10% FBS的人间充质干细胞*培养液）终止消化。 
6，1000 rpm离心5 min，去上清，加入人间充质干细胞*培养液2 ml。 ,
7，多次轻轻吹打细胞，制成单细胞悬液。 
8，按照1:2-1:3的比例进行传代。 
9，放入37℃培养箱内培养。