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1301:人急性T淋巴细胞使用说明书

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1301:人急性T淋巴细胞使用说明书:
     【细胞缩写】    1301细胞
    【细胞名称】    1301(人急性T淋巴细胞)
    【背景资料】    见细胞说明书
    【细胞消化时注意把握消化时间,消化不够会导致吹打细胞时造成损伤,一般消化时间是2-3分钟,但以镜检时大部分细胞缩回球形为准,一般2次即可将细胞吹打下来,消化不够进行细胞吹打易损伤细胞。细胞系的冻存液配方:90%FBS+10%DMSO,贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养】    细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学建系
    【代次】    P4
    【规格】    复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
    【细胞数】    1*10(6)
    【生物安全级别】    1
    【生物体】    人
    【组织来源】    器官:外周血;疾病:急性成淋巴细胞性白血病;内皮
    【细胞形态】    T淋巴细胞
    【细胞特性】    悬浮
    【特别注意:1301:人急性T淋巴细胞如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养,贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养,如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时实验室技术人员会跟进解决】    
细胞接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时实验室技术人员会跟进解决
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(zui高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑*消化后,转移到新的培养瓶继续培养
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜1301:人急性T淋巴细胞进行培养
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,1301:人急性T淋巴细胞加2-3ml 0.25%*进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉*,加6-8ml*培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间zui长不宜超过72小时)
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并实验室。
Mouse Anti-influenza B virus nucleoprotein Monoclonal      规格:    规格:     0.1ml    产品名称:    鼠抗人禽流感B核蛋白单克隆抗体
Anti-IFABP      规格:    规格:     0.2ml    产品名称:    小肠型脂肪酸结合蛋白抗体
Anti-IFITM1       规格:    规格:     0.2ml    产品名称:    干扰素诱导跨膜蛋白1抗体
Anti-IFN-β Anti-human      规格:    规格:     0.1ml    产品名称:    干扰素-β抗体
Anti-IFN-γ     规格:    规格:     0.1ml    产品名称:    鼠抗人干扰素-γ/IFN-gamma单克隆抗体
1301:人急性T淋巴细胞

 

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