胚胎成纤维细胞培养方法

胚胎成纤维细胞介绍

胚胎干细胞（Embryonic Stem Cell，ESC）是由囊胚的内细胞团（InnerCellMass，ICM）分离培养的具有分化特性的细胞，具有*自我增殖、自我更新和多向分化的潜能，能够再生出各种功能细胞和组织器官。体外培养ESC的基本原则是在促进ESC增殖的同时，维持其未分化的二倍体状态，保持其向三个胚层细胞分化的潜能。ESC体外培养主要采用饲养层培养法，目前使用zui普遍的饲养层细胞有小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse Embryonic Fibroblast，MEF）及小鼠成纤维细胞无限系（STO）细胞。MEF作为饲养层培养ESC是一种zui常用的方法，它能有效地促进ESC的增殖并维持其未分化性和多潜能性，可用于大多数动物ESC的分离，大多数实验室均采用该细胞。

细胞特性

1)来源：取13.5d、14.5d的孕鼠昆明小鼠或者C57BL/6小鼠

2)含量：>5x105个/mL

3)鉴定：Vimentin与Keratin蛋白免疫荧光染色法

4)纯度：>85%

5)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

6)规格：1mL冻存管包装

运输和保存： 1mL冻存管干冰运输。

胚胎成纤维细胞使用：仅供科研使用。

细胞培养方法

1）*培养基：小鼠胚胎成纤维细胞培养基

2）培养方式：成纤维样细胞，贴壁培养

注意事项：

1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4.胚胎成纤维细胞所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。