其它elisa免疫检测试剂盒感受态细胞制备/转化

1. 其它elisa免疫检测试剂盒成长状况和密度: 不要用通过屡次转接或储于4℃的培育的细菌,从－70℃或-20℃甘油保管的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液.细胞成长密度以刚进入对数成长期时为好,可通过监测培育液的OD600 来操控.DH5α菌株的OD600 为0.5时, 细胞密度在5×107 个/ml左右（不一样的细菌状况有所不一样）,这时对比适宜.密度过高或缺乏均会影响转化功率.
2. 质粒的质量和浓度: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态DNA（cccDNA）.转化功率与外源DNA的浓度在必定范围内成正比,但当参加的外源DNA的量过多或体积过大时,转化功率就会下降.1ng的cccDNA即可使50μl 的感受态细胞到达饱满.通常状况下,DNA溶液的体积不该超越感受态细胞体积的5％.
3. 试剂的质量: 所用的试剂,如CaCl2 等均需是Z高纯度的（GR.或AR.）,并用超纯水制造,分装保管于枯燥的冷暗处.
4. 避免杂菌和杂DNA的污染：整个操作进程均应在无菌条件下进行, 所用器皿, 如离心管, tip*是新的,并经高压灭菌处置,一切的试剂都要灭菌,且注意避免被其它试剂、DNA酶或杂DNA所污染, 不然均会影响转化功率或杂DNA的转入, 为今后的挑选、判定带来不必要的费事.
本试验以E.coli DH菌株为受体细胞,并用CaCl2处置,使其处于感受态,然后与pBS质粒共保温,完成转化.因为pBS质粒带有氨苄*抗性基因（Ampr ）,其它elisa免疫检测试剂盒可通过Amp抗性来挑选转化子.如受体细胞没有转入pBS,则在含Amp的培育基上不能成长.能在Amp培育基上成长的受体细胞（转化子）必定已导入了pBS.转化子扩增后,可将转化的质粒提取出,进行电泳、酶切等进一步判定.
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