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其它elisa免疫检测试剂盒实验条件选择的重要性

时间:2018/4/10阅读:144
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其它elisa免疫检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的Z适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值Z大而蛋白量Z少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml.
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。其它elisa免疫检测试剂盒有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。
检查    100mg    171254-200401    2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮
检查    100mg    171254-200401    *杂质B
鉴别    100mg    171256-200401    盐酸*
有关物质    50mg/支    171267-201001    2-氨基-5-硝基二苯酮
有关物质    50mg/支    171267-201001    *杂质
有关物质    50mg/支    171268-201001    2-氨基-5-氯二苯酮
有关物质    50mg/支    171268-201001    氯氮卓杂质Ⅰ
有关物质    20mg    171270-201001    N-脱烷基西泮
有关物质    20mg    171270-201001    *杂质
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