酶联免疫吸附试验（ELISA） 基本原理

酶联免疫吸附试验（ELISA） 基本原理

酶联免疫吸附试验的基本原理是将过量抗体（抗原）包被于载体上，通过抗原抗体反应使酶标记抗体（抗原）也结合在载体上，经洗涤去除游离的酶标记抗体（抗原）后，加入底物显色，定性或定量分析有色产物确定待测物的存在与含量的检测技术。

（二） 技术类型

酶联免疫吸附试验的主要技术类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕获法等。

1．各种技术类型的原理如下：双抗体夹心法用于检测抗原。它是利用待测抗原上的两个抗原决定簇A和B分别与固相载体上的抗体A和酶标记抗体B结合，形成抗体A-待测抗原-酶标抗体B复合物，复合物的形成量与待测抗原含量成正比，属非竞争性反应类型。

间接法用于测定抗体。它的原理是将已知抗原连接在固相载体上，待测抗体与抗原结合后再与酶标二抗结合，形成抗原-待测抗体-酶标二抗的复合物，复合物的形成量与待测抗体量成正比，属非竞争性反应类型。

竞争法既可用于检测抗原又可用于检测抗体。它是用酶标抗原（抗体）与待测的非标记抗原（抗体）竞争性的与固相载体上的*抗体（抗原）结合，待测抗原（抗体）多，则形成非标记复合物多，酶标抗原与抗体结合就少，也就是酶标记复合物少，因此，显色程度与待测物含量成反比。

捕获法用于测定IgM类抗体。固相载体上连接的是IgM的二抗，先将标本中的IgM类抗体捕获，防止IgG类抗体对IgM测定的干扰，此步骤也是其称为捕获法的原因所在，然后再加入特异抗原和酶标抗体，形成抗体IgM-IgM-特异抗原-酶标抗体的复合物，复合物含量与待测IgM成正比，也属非竞争性反应类型。