人白细胞抗原B27（HLA-B27）试剂盒实验原理

人白细胞抗原B27（HLA-B27）试剂盒实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞抗原B27(HLA-B27)水平。用纯化的人白细胞B27(HLA-B27)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞抗原B27(HLA-B27)，再与HRP标记的白细胞B27(HLA-B27)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞抗原B27(HLA-B27)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞抗原B27(HLA-B27)浓度。

操作总程序：

计算以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与  OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

人白细胞抗原B27（HLA-B27）试剂盒注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有

析出，稀释时可在浴中加温助溶，洗涤时不影响。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间

控制在 5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本  OD值

大于标准品孔*孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计

算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行试验。

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

人白细胞抗原B27（HLA-B27）试剂盒保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月