小鼠胚胎成纤维细胞说明书

小鼠胚胎成纤维细胞生长特性复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过Z易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
Acc-2(人涎腺腺样囊性癌细胞)    5×106cells/瓶×2
ACHN(人肾癌细胞)    5×106cells/瓶×2
AGS(人胃腺癌细胞)    5×106cells/瓶×2
Ana-1(小鼠巨噬细胞)    5×106cells/瓶×2
Anglne(人卵巢癌细胞)    5×106cells/瓶×2
AR42J(大鼠胰腺外分泌细胞)    5×106cells/瓶×2
ARPE-19(人视网膜上皮细胞)    5×106cells/瓶×2
AsPC-1(人胰腺癌细胞)    5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂体瘤细胞)    5×106cells/瓶×2
B16(小鼠黑色素瘤细胞)    5×106cells/瓶×2
BEL-7402(人肝癌细胞)    5×106cells/瓶×2