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肌组织ATCC细胞培养

时间:2017-8-28阅读:202
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骨骼肌ATCC细胞培养
1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。
2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。
3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,常用Hanks液配的0.01%明胶。 
 肌细胞培养
1.选新鲜受精鸡卵,置温箱中孵育(温箱中放有水槽,以维持箱内温度),每日翻动一次(180度),孵育9~12天。
2.取鸡胎法相间《组织培养和分子细胞学技术》53页。
3.用眼科剪剪开胸腔,ATCC细胞剥出心脏,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。
4.小心剪除大的动静脉,保留心室肌,用组织块或消化培养法均可。
50μl    Ionomycin(钙离子载体, 5mM)    
50μl    Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针)    
50次    质粒小量抽提试剂盒    
50次    质粒中量抽提试剂盒    
50次    酵母质粒小量抽提试剂盒    
50次    PCR/DNA纯化试剂盒    
50次    DNA凝胶回收试剂盒    
50次    哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒    
50次    基因组DNA小量抽提试剂盒(离心柱式)    
50次    细胞凋亡-DNA Ladder抽提试剂盒    
50次    细胞凋亡-DNA Ladder抽提试剂盒(离心柱式) 
ATCC细胞   

 

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