人正常组织细胞转化如何调控？

人正常组织细胞该研究旨在探讨Hedgehog-Gli1(HH)信号在肾小管上皮细胞表型转化(epithelial-mes-enchymal transition, EMT)和胶原累积中的作用及与TGF-β1信号的对话机制。该实验通过体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E, 以溶剂作为对照组, 以1~50 ng/mL重组蛋白sonic hedgehog(Shh)或5 ng/mL TGF-β1作为诱导组, 以加入或不加入HH信号特异性阻断剂环靶明(cyclopamine, Cyp)5 μmol/L为干预组。细胞培养24 h, 采用ELISA、qRT-PCR、免疫细胞荧光染色和Western blot等方法检测HH信号相关分子(Ptch1、Smo和Gli1)、TGF-β1、EMT相关分子(Rac1蛋白、肌成纤维细胞标志物α-SMA和上皮细胞标志物E-cadherin)、III型胶原mRNA或蛋白的表达。结果发现, 外源性Shh上调Smo和Gli1表达, 抑制Ptch1表达, 继而激活HH信号; HH信号活化抑制肾小管上皮细胞E-cadherin的表达, 上调α-SMA、III型胶原和TGF-β1的表达。环靶明干预后, Smo表达下调, 进而抑制HH信号、EMT和胶原累积, 并下调TGF-β1的表达。应用TGF-β1诱导小管上皮细胞EMT, 同时也上调HH信号分子Smo和Gli1的表达, 下调Ptch1的表达, 提示TGF-β1可诱导HH信号活化。综上所述,HH信号和TGF-β1均参与了肾小管上皮细胞EMT和胶原累积过程。HH信号活化可促进TGF-β1的表达, 同时TGF-β1能激活HH信号, 推测TGF-β1与HH信号可能存在交叉对话以调控EMT和胶原累积。

Hedgehog-Gli1(HH)信号通路是一条进化保守的、与干细胞增殖分化密切相关的信号通路。正常表达的HH信号在人类发育过程中起着重要作用, 但持续异常激活的HH信号可导致胰腺癌和胃癌等多种肿瘤的发生。Z近研究发现, HH信号活化与组织纤维化的发生密切相关。我们前期的研究结果显示, 输尿管梗阻或者马兜铃酸诱导肾小管上皮细胞表型转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和细胞外基质(extracellular matrix, ECM)累积过程中, HH信号均存在不同程度的活化, 同时伴有转化生长因子TGF-β1的高表达。但HH信号与TGF-β1之间的相互关系及影响EMT和ECM累积的分子机制目前尚不清楚。本研究分别通过外源性重组蛋白活化HH信号和诱导TGF-β1高表达, 人正常组织细胞并进行药物干预, 以观察两者间的对话, 评价其对EMT和ECM累积的影响。
Copovidone        100mg    共聚维酮标准品
Corn Oil (AS)    8001-30-7    1g    玉米油标准品
Corticotropin    9002-60-2    5 vails    促肾上腺皮质激素标准品
Cortisone Acetate    1950/4/4    150mg    醋酸可的松标准品
Cottonseed Oil (AS)    8001-29-4    1g    棉籽油标准品
Creatinine    60-27-5    100mg    肌酸酐标准品
Cromolyn Sodium    15826-37-6    500mg    色甘酸钠标准品
Crospovidone    9003-39-8    100mg    交联聚维酮对照品标准品
人正常组织细胞