原代细胞冻存

原代细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中，及时冻存原始细胞是十分重要的。在杂交瘤单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞的冻存保种常常是*的实验操作。因为在没有建立一个稳定的细胞系或稳定分泌抗体的细胞系的时候，细胞的培养过程中随时可能因细胞的污染、分泌抗体能力的丧失或遗传变异等导致实验失败，如果没有原始细胞的冻存，则因为上述的意外而前功尽弃。
培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，
用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。
其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。
预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境*消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
原代细胞注意事项     
  1.DMSO 不用高压灭菌；DMEM不能高温高压灭菌，可以过滤除菌。
  2.DMSO要用新的，而且要避光保存。
  3.DMSO：含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。
TLC法鉴别    红豆蔻    中药对照药材    121012-200502        1.0g
TLC法鉴别    麦冬    中药对照药材    121013-200506        1.0g
TLC法鉴别    两面针    中药对照药材    121014-200302        1.0g
TLC法鉴别    诃子    中药对照药材    121015-200503        0.5g
TLC法鉴别    青蒿    中药对照药材    121016-200403        1.5g
TLC法鉴别    苦木    中药对照药材    121017-200503        0.5g
TLC法鉴别    苦玄参    中药对照药材    121018-200503        1.0g
TLC法鉴别    苦参    中药对照药材    121019-200505        1.0g
原代细胞