当前位置:上海莼试生物技术有限公司>>PCR检测试剂盒>>RNA/DNA提取>> 电泳级SYBR Green I 10000X
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
参数规格:
产品名称:电泳级SYBR Green I 10000X
产品分类:RNA/DNA提取试剂盒
货号:CP100778
产品规格:详见说明
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
DNA Marker I(0-0bp) 0次7-Amino-methyl-cephem-carboxylic acid222523
DNA Marker II(00bp) 0次7-Acetoxy-methylcoumarin2747/5/97-乙酰氧基-
DNA Marker III(0000bp) 0次7,8-Dimethoxy,3-dihydroH-benzazepin-one739427
DNA Marker IV(0000bp) 0次6β-Hydroxystigmast-en-one36426β-羟基豆甾-烯-酮
DNA Marker V(0000bp) 0次6-O-Methylcerevisterol129
小鼠白细胞介素elisa试剂盒 小鼠白细胞介素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠白细胞介素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠白细胞介素试剂盒、小鼠白细胞介素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Cerebroside D 中文名:脑苷脂D 分子式:C43H81NO9
小鼠白细胞介素25(IL-25)ELISA试剂盒 Chenodeoxycholic acid 474-25-9 中文名:鹅去氧胆酸 分子式:C24H40O4 度:99.0% 关键词: 胆烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
小鼠白细胞间介素 1 英文名称: Mouse Ierleukin 1 规格: 48T/96T 英文缩写: IL-1 Fenazox 61618-27-7 中文名:氨芬酸钠 分子式:C15H14NNaO4
小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒 Chenodeoxycholic acid 474-25-9 中文名:鹅去氧胆酸 分子式:C24H40O4
小鼠白细胞分化抗原30(CD30)ELISA试剂盒 Cerevisterol 中文名:啤酒甾醇 分子式:C28H46O3 度:96.5%
电泳级SYBR Green I 10000X(标准品) Hydrocortisone 质量规格:HPLC>98%,标准品 MouseInhibin,INH-AELISA试剂盒小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
富马酸伊布利特 Ibutilide fumarate 质量规格:>99%,BR 小鼠瘦素(LEP/Leptin)ELISA试剂盒 ,英文名: LEP/Leptin ELISA Kit
富马酸伊布利特(标准品) Ibutilide fumarate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA检测试剂盒ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 96T/48T
硫酸异帕米星 Isepamicine Sulphate 质量规格:含量≥670µg/mg 人6-羟多巴胺(6-OHDA)试剂盒 Human 6-hydroxydopamine,6-OHDA ELISA Kit
蓓萨罗丁;贝沙罗汀 Bexarotene 质量规格:>99% 英文名称MouseIL-12(P40)ELISAKIT小鼠白介素-12(P40)IL-12(P40)规格:96T/48T
蓓萨罗丁(标准品) Bexarotene 质量规格:>99% 冰冻切片组织PASE-6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
酮洛芬 Ketoprofen 质量规格:>99%,AR RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISA试剂盒大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
酮洛芬(标准品) Ketoprofen 质量规格:HPLC>98%,标准品 小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒 ,英文名: LEP ELISA Kit
富马酸酮替芬 Ketotifen fumarate 质量规格:>99%,BR 小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)ELISA检测试剂盒MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2ELISAkit 96T/48T
富马酸酮替芬(标准品) Ketotifen fumarate 质量规格:HPLC>98%,标准品 人高铁血红蛋白(MHB)试剂盒 Human Methemoglobin,MHB ELISA Kit
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。