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参数规格:
产品名称:石蜡包埋组织DNAout
产品分类:RNA/DNA提取试剂盒
货号:CP100747
产品规格:详见说明
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
JM1化学感受态细胞 ×0ul 4-(4-Fluorophenyl)-isopropyl-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-yl-formyl1471187
Top化学感受态细胞 ×0μl 4-(4-Aminophenyl)morpholin-one43569
DNase I溶液(蛋白提取用)KU 4-(4-(5-(Aminomethyl)-oxooxazolidin-yl)phenyl)morpholin-one44629
T4 DNA ligase0U 4-(4-(5-(Aminomethyl)-oxooxazolidin-yl)phenyl)morpholin-one 8985436
pUC182ug3β-Hydroxyporiferast-en-one1451637
小鼠凋亡诱导因子 英文名称: apoptosis-inducing factor 规格: 48T/96T 英文缩写: AIF Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 139481-28-0 中文名: 分子式:C22H17N3O4
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Methylprednisolone acetate 53-36-1 中文名:泼尼松龙醋酸酯 分子式:C24H32O6
小鼠凋亡因子BAX 英文名称: apoptogen BAX 规格: 48T/96T 英文缩写: BAX Dehydroepiandrosterone 53-43-0 中文名:脱氢表雄酮 分子式:C19H28O2 度:99.0% 关键词:
小鼠凋亡抑制基因(Bcl-2)ELISA试剂盒 Cyclopropyl 2-fluorobenzyl ketone 中文名: 分子式:C11H11FO 度:98.0%
小鼠凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒 Cyclopropyl 2-fluorobenzyl ketone 中文名: 分子式:C11H11FO
石蜡包埋组织DNAout阿德福韦/阿德福韦酯(标准品) Adefovir dipivoxil 质量规格:HPLC>98%,标准品 小鼠髓细胞触发受体2(EM2)ELISA试剂盒 ,英文名: EM2 ELISA Kit
R-盐酸普拉克索 R-Pramipexole Di Monohydrate 质量规格:度大于99%,R构型 豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA检测试剂盒guineapigtissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T
氯氮平 Clozapine 质量规格:>99% 牛结核杆菌(MTB)抗体(IgM)试剂盒 Bovine mycobecterium tuberculosis(MTB)aibody IgM ELISA kit
氯氮平(标准品) Clozapine 质量规格:HPLC>98%,标准品 英文名称HumanBonemorphogeneticproteieceptorIIELISAKit人骨成型蛋白质受体II(BMPRII)规格:96T/48T
恩诺沙星 Enrofloxacin 质量规格:>98.5% 动物细胞/组织高质化线粒体分离试剂盒10
恩诺沙星(标准品) Enrofloxacin 质量规格:HPLC>98%,标准品 RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISA试剂盒大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸恩诺沙星 Enrofloxacin HCL 质量规格:>98.5% 小鼠髓细胞触发受体1(EM1)ELISA试剂盒 ,英文名: EM1 ELISA Kit
盐酸恩诺沙星(标准品) Enrofloxacin HCL 质量规格:HPLC>98%,标准品 豚鼠球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒guineapigImmunoglobulinA,IgAELISAKit 96T/48T
佐米曲普坦 Zolmitriptan 质量规格:>99% 牛结核杆菌(MTB)抗体(IgG)试剂盒 Bovine mycobecterium tuberculosis(MTB)aibody IgG ELISA Kit
胸腺肽alpha 1 Thymosin alpha 1 Acetate 质量规格:BR,进分 英文名称HumanBonemorphogeneticproteieceptor1AELISAKit人骨成型蛋白质受体1A(BMPR1A)规格:96T/48T
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
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