牛巴氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 返回列表页

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

参数规格：
产品名称：牛巴氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
产品分类：荧光定量PCR
货号：CP101187
产品规格：50次
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。

酞菁(以升华法化)Phthalocyanine (purified by sublimation)质量规格：>98.0%(N)  小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 ，英文名： aGT ELISA Kit  Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLAELISA试剂盒豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苉(升华提)Picene (purified by sublimation)质量规格：>99.5%(GC)  小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 96T/48T  Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5,6,11,12-四苯基并四苯(升华提)5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)质量规格：>99.0%(GC)  人活化素受体样激酶1(ALK1)试剂盒 Human Activin Receptor-Like Kinase 1,ALK1 ELISA Kit  人牛小肠碱性1酸酶(CIAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十六氟酞菁铜(II)(以升华法化)1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)质量规格：>98.0%(N)(T)  RatCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  小鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)试剂盒 Mouse suppressors of cytokine signaling 3,SOCS-3 ELISA Kit
胰蛋白酶原Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas质量规格：BC  犬P物质受体(TACR1)试剂盒 Dog Substance-P receptor,TACR1 ELISA kit  人前列腺素E1(PGE1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

色胺(>98%,BR)Tryptamine质量规格：>98%,BR  英文名称HumanneuropeptideYELISAKit人神经肽Y(NPY)规格：96T/48T  小鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒 Mouse Angiotensin conveing enzyme,ACE ELISA Kit

三氧化钨(>99%,BC)Tungsten (VI) oxide质量规格：>99%,BC  胆碱酯酶(CHE)定量检测试剂盒50  肺炎链球菌(SP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

碳化钨200(>99%,BC)Tungsten carbide-200质量规格：>99%,BC  Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISA试剂盒大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒规格：96T/48T  Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISA试剂盒人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
牛巴氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Zinc-Fixative（锌固定液）

Glycine-NaOH Buffer

TCA Solution
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。