通常情况下，我们所使用的液相色谱柱在长时间使用后会出现柱效降低，分离度变差的情况。这时，我们需要对色谱柱进行再生。
再生
对于常用的反相色谱柱柱效降低需要再生时，建议按照以下流程冲洗：
1、20CV 水:乙腈=95%:5%
2、20CV 乙腈
3、5CV 异丙醇
4、20CV 正己烷
5、20CV 乙腈
6、20CV 水:乙腈=95%:5%
7、所使用的流动相重新平衡色谱柱。
学会了色谱柱的再生，我们也得了解如何在实验过程中保护色谱柱。首先，我们需要了解色谱柱的损坏来源于哪些方面。
1、泵头密封圈磨损。
2、进样阀转子密封圈磨损。
3、缓冲盐的析出。
4、样品中的复杂易吸附基质组分。
这些问题大多会造成色谱柱背压升高。
预防
为了降低色谱柱损伤问题，建议在使用色谱柱时做一些预防措施。
1、在液相系统中加入在线过滤器
在线过滤器的内部颗粒空隙一般为0.5μm，对于UHPLC会选择0.2μm空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸接近或略小于柱头的筛板尺寸。所以，在线过滤器可以有效地阻隔来自样品、泵头密封垫。进样阀转子密封垫的颗粒物，乙方柱头过滤筛板堵塞。
2、在柱子前端使用保护柱
保护柱有很多种，通用型、一体式、卡套式均为与分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因其具有与分析柱相同的内部填料，所以保护住不仅可以阻隔颗粒物，还可以阻隔易吸附的样品基质组分。
3、对样品进行净化处理
常用的净化手段是过滤，包括0.45μm、0.22μm微孔滤膜等。
保存
实验结束后，色谱柱的合理保存也是保护色谱柱的关键，同时也是影响色谱柱使用寿命的关键。
1、短期保存
应保存在***接近常用的流动相条件下，并且移除系统中的缓冲盐、酸等。
2、长期保存
将色谱柱按照说明书保存在对应的溶剂中，并且将色谱柱从系统中去下，两头 用堵头密封。
