色谱图出现双峰解决办法
阅读：250发布时间：2025-3-24
液相色谱仪的分析当中。在液相色谱柱正常情况下，样品的灵敏度足够。分析的方式合适，色谱峰在出峰的时间比较短的情况下。峰型应对称并且是尖锐的。但是，在对样品了解程度不够。方法不足的时候，样品的出来和进样方法都不正确下，。***会出现各种想不到的问题和各种不满意的结果，本文主要将解色谱出现双峰的可能以及处理办法
色谱双峰可能的原因有三种。
1、液相色谱柱色谱柱
如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现（出峰越快，双峰的可能性会减少），尤其采用单一纯物质时，可以肯定色谱柱出问题，柱头受损或柱头固定相变脏或流失。
如果进样量少，原来色谱柱正常，色谱峰的形状多为一大峰带一小峰，不一定拖尾，这一般应是柱头受堵，将色谱柱反过来接，用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉，再反过来，一般情况下***行了。
当然不反冲，正冲有时也会正常的。如果峰拖尾，双峰强弱相差不大，柱头固定相变脏或流失可能性更大，这是可以将进样那头拧开，将微孔滤片超声，柱头刮去一部分填料，重新填上新填料拧紧，不过这种活，需要一定技术，同时不能老干那种事，否则用不了几次，色谱柱***会应柱效很低而报废。
2、溶剂极性及进样量
许多HPLC分析者对此可能不以为然，一般的HPLC的书籍和文献都不会提到这方面的内容，而这确是双峰产生的一个很重要的原因。目前HPLC分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。
样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。******的溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。
当用溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主，样品进样量大，如定量管为20ul，此条件下******可以肯定，单一的纯物质出双峰，******峰比******峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时间会提前（相对进样量少而言），将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。
上面提到进样量造成双峰的一个原因，另一个原因是，进样量不一定大，但******量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色谱柱问题）。将样品稀释再进样***可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。
3、样品的特性
有些样品由于其化学结构的特点，存在互变异构现象，而这种互变异构体无法分开，而是以一个动态平衡存在。在色谱分析时，在一个特定的条件下，一种物质将出现双峰，双峰靠的很近，基本齐高，不拖尾，条件稍一变化，尤其pH，双峰现象将消失，如等。
有的样品紫外的色谱图上看不到双峰，但在LC－MS下，用质谱检测器，其质谱的总离子流图上较明显，例如农药啶虫眯（吡虫清）。
