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液相色谱的种类

阅读:16发布时间:2025-3-25

大家都知道液相色谱,但是液相色谱有哪些种类。你们都认识.都使用过吗?下面成都摩尔科学仪器有限公司为大家介绍一下液相色谱都有哪些常见的种类。

首先来做个小实验:

把一块黄油和一勺蔗糖分别放入水中,我们会发现,黄油很难溶解,而蔗糖很快溶解。这***是常说的“相似相溶"。

极性分子蔗糖与极性的水分子作用力强,因此,蔗糖很容易溶解在水中。

而黄油是由许多非极性分子组成的,更易溶于非极性溶剂中。
了解了相似相溶原理,接下来我们来看液相色谱的分类。
液相色谱有很多种类,其中正相色谱是***先被发明出来的,它的特点是色谱柱里固定相极性大于流动相的极性。

在正相色谱中,流动相是弱极性的,比如正己烷,石油醚等。

而固定相是有极性的,比如布满硅羟基的硅胶。

这些极性的硅羟基***像赛道两边的小手,和进入色谱柱的化合物发生相互作用。
根据相似相溶原理,极性大的化合物和小手的作用更强,出峰***会慢一些。
极性弱的化合物与硅羟基彼此不感兴趣,出峰***会快一些。

在化学家掌握了硅胶的化学键合技术之后,反相色谱得到了很大的发展。
色谱

正如其名,反相色谱***是和正相色谱反过来。
它的流动相是强极性的,比如甲醇/水

而固定相是弱极性的,比如十八烷基键合硅胶柱,也叫C18柱,***是把硅胶上原本的硅羟基变成了一条碳十八的长链。

这样一来硅胶表面***从强极性变成了弱极性。

虽然正相色谱是先发明的,但使用并不普遍。现在,反相色谱的应用占到了所有液相应用的80%以上。

一来,反相色谱的流动相不再需要烃类、氯仿这些更危险的有机溶剂,使用起来更加简单和安全。

二来,液相和气相是互相补充的技术。极性弱,沸点低的化合物优先用气相分析。

而极性强的化合物由于分子间作用力更强,往往沸点不低,不适合用气相分析,更适合用反相液相色谱分析。

这是为什么呢?

另外,反相色谱的流动相有更多的参数选择,比如pH、缓冲盐的种类和浓度等,能更好地调整分离效果,而正相色谱可调整的流动相参数非常有限。此外,还有一些化合物,既不适合用正相分析,也不适合用反相分析,比如糖类。

因为糖类有很多羟基,极性很强。

若用反相分析,糖和C18没有相互作用,出峰太快,无法分离。
若用正相分析,糖类又不能溶解在正己烷这种非极性的流动相里,也无法分离。
这种情况,我们可以尝试使用亲水作用色谱,HILIC模式。
近几年关于LCMS的HILIC应用研究非常热门,它使用类似于正相的色谱柱,比如硅胶,和传统反相的流动相,比如乙腈/水。

这样的组合即能够溶解样品,又能够保留样品,***终使样品得到很好的分离。

如果化合物的极性特别强,一言不合***电离。

还可以选择离子对色谱,或者离子交换色谱,来增强离子和固定相的相互作用,使不同的化合物得到分离。

不管是正相、反相还是离子交换色谱,化合物出峰的情况都是和极性相关的,而凝胶色谱的出峰却只和化合物的大小有关,所以也叫体积排阻色谱。

当样品流经凝胶色谱柱时,直径较大的化合物,不易进入凝胶颗粒的微孔中,所以很快出峰。
而直径较小的化合物会进入凝胶颗粒的微孔中,并不断的进出和扩散,因此,较晚出峰。

                                                                                                                                           本文来自(色谱学堂


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